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酶免疫分析技术的详细讲解:你了解吗?

2024-03-16 10:15:49如何怀孕点击:149

酶联免疫分析技术是标记免疫分析中的一项重要技术。酶底物是检测中常用的主要试剂,因为它是一种发光剂。因此,该方法采用特定的仪器进行测量,以获得本体反应的特异性和酶催化底物反应的有效结合。

酶免疫分析技术的结果。该技术在检验医学中的广泛应用也可以在一定程度上提高发光酶的免疫分析能力。该方法是一项新技术的发展,实验结果准确。更多相关知识阅读参考:酶联免疫吸附测定原理与流程随着酶联免疫吸附技术的不断创新,可以增强现有检测中的发光信号,与发光信号持续时间稳定技术的有效结合可以有效提高检测结果。酶免疫技术的分析灵敏度克服了传统发光酶免疫分析的缺点。另外,酶联免疫吸附技术应用简单,检测结果准确,为BAS-酶联免疫吸附试验。该实验方法逐步扩大了生物素在检验医学中高精度的应用范围。在这里,亲和素BAS 扩增系统与ELISA 相结合。目前,免疫分析中的标记技术主要有酶免疫分析技术、荧光免疫分析技术、放射性免疫分析技术、金免疫分析技术、化学发光免疫分析技术等。酶免疫分析技术是以酶标记抗体(抗原)为重要标记的免疫检测技术。试剂并将抗原抗体反应的特异性与酶催化底物反应的效率和特异性结合起来。酶联免疫技术作为三大经典标记技术之一,在检测医学中得到了广泛的应用和更新。 1.常用酶和有色底物。用于酶免疫标记的酶应具有较高的催化活性和较强的催化一致性;与抗原、抗体偶联后,不影响抗原、抗体的免疫反应和酶活性;催化底物易于制备,催化底物产生的信号产物易于观察和检测;目前常用的酶和底物见表1。 2. 标记物的制备酶联免疫分析技术中标记物的抗原应具有较高的纯度和完整性;标记物抗体应具有特异性好、高效、高亲和力、高活性、可批量生产、易于分离纯化等特点。酶标记的制备方法应简单、得率高;应防止酶、抗体(抗原)和酶标记产生聚合物;标记反应不应影响酶的活性和抗原、抗体的免疫反应。标签制备方法基本分为两类: (1)交联法交联法是将酶和抗体(抗原)结合起来的交联剂“桥梁”,将酶和抗体(抗原)分别连接起来。目前比较常用的方法是戊二醛交联法。形成的组合物为酶-戊二醛-抗体(抗原)。 (2)直接法。直接法是先用活性剂激活酶,活性酶分子上的碱基可直接与抗体(抗原)结合产生标记,如碘酸钠法。形成的成分是:酶抗体(抗原)。 3.酶免疫分析技术的类型酶免疫分析技术分为酶免疫组化技术和酶免疫分析技术(EIA)。酶免疫分析可分为同质酶免疫分析和异质酶免疫分析。 (1)均相酶免疫分析均相酶免疫分析是利用酶标记物结合成抗原抗体复合物,然后抑制标记酶的活性的技术。因此,不需要在反应后分离结合和分散的酶标记,直接测量系统中总标记酶活性的变化,确定结合酶标记的总数,从而获得待测对象的含量。常用于药物、激素、助孕、兴奋剂等半抗原或小分子抗原的测定。常用的技术类型助孕括: 1、酶联免疫分析增强分析技术(EMIT):增强酶联免疫分析技术中对酶活性的抑制是由于标记抗原与抗体结合后的空间位置,阻碍了酶的结合到基材。常见的反应竞争方法是,抗原与抗体结合越多,抗原与抗体结合越少,酶活性受到的抑制越少,酶活性越高。因此,比较终测得的酶活性与未标记物质的量呈正相关。

2.复制酶供体免疫测定(CEDIA):在复制酶供体免疫测定中,酶同时存在于供体和受体片段中。只有两个片段结合在一起才能产生具有活性的全酶。当用供体酶标记的抗原与抗体结合时,空间位置阻止酶供体(ED)和酶受体(EA)之间形成活性全酶,酶活性受到抑制。反应模式也是竞争性测定的组合,比较终测得的酶活性与未标记抗原含量呈正相关。见图2。 (1)异相酶免疫分析异相酶免疫分析与均相酶免疫分析的主要区别在于,抗原抗体反应平衡后,反应体系中存在两种分散和结合的酶标记。两个标记物上的酶都具有酶活性,只有组合的酶标记物的形成和含量才代表待测物的存在和含量。因此,需要将分散状态和组合状态的酶标记物分开,测定组合状态下酶标记物的活性,计算待测物的含量。由于分离和结合标记物的方法不同,异质酶免疫分析分为液相酶免疫分析和固相酶免疫分析。液相酶免疫分析,由于分散和结合的标记物存在于液相中,因此需要酶标在结合状态下的活性。固相酶免疫分析是将组合的酶标记吸附在固相支持物上,分散的酶标记只需洗涤即可去除。目前,比较常用的是使用酶联免疫吸附测定(ELISA)的固相酶免疫测定。如果您想了解更多怀孕知识请点击:无忧怀孕

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